无血清培养基由营养*的基础培养基添加激素,生长因子,贴壁因子和结合蛋白而组成。
(一)基础培养基
早期用于细胞培养的基础培养基有血浆凝块,淋巴液,大豆蛋白胨和胚胎浸膏等天然培养基。1950年Morgan等在前人的研究基础上研究出199培养基,是动物细胞培养基发展到一个崭新的阶段,及合成培养基阶段。合成培养基是按细胞生长需要将一定比例的氨基酸、维生素、无机盐、葡萄糖等组合成的基础培养基。目前市场上已经有上百种的合成培养基商品。在众多的合成培养基中,MEM、DMEM、RPMI 1640、F12、和TC100的使用。
基础培养基的成分是*已知的,因此在无血清培养基对不同的细胞株进行培养时可以对基础培养基的某些组分进行相应的调整,以更好的符合细胞株的营养要求或提高目的蛋白的表达量。
(二)主要添加因子
又称补充因子,是代替血清的各种因子的总称。多数无血清培养基必须补加3—8种因子,任何单一因子都不能取代血清。已知有100多种此类因子,其中有些是必须补充因子,如胰岛素、亚硒酸钠和转铁蛋白,其他多数为辅助作用的因子。