技术点心：减少超滤浓缩发生蛋白沉淀

蛋白相较于核酸，因其承担生物学功能，有“活性”特征，蛋白样品的处理要求操作者有更好的经验和技巧。拿蛋白浓缩这一常规操作来讲，根据样品规模（体积）、通量（样品个数）、混合物的复杂程度及相关设备配套要求，就分为盐析、透析、冻干、分子筛色谱等等不同选择。而超滤，不论从操作的简便性还是处理效率来说，都算优势突出，成为蛋白浓缩/除盐/缓冲液置换等蛋白综合处理的。掌握好超滤技巧，我们就能更好地保全蛋白活性和得率。针对于蛋白在超滤浓缩过程中容易发生沉淀这个现象，就超滤管的使用提出一些建议，供您灵活选用。

蛋白如果浓缩过快或者过度浓缩都有可能引起蛋白沉淀。我们建议蛋白浓缩后的zui终浓度不超过20mg/ml。对于对浓缩速度敏感而容易沉淀的蛋白，我们建议的改进方法是：

1）离心力降为推荐离心力的30%-50%；

2）改选择截留分子量更大的过滤装置（如原本选用10k，此时可以选择30k）；

3）在浓缩过程中取出超滤管，用枪头反复吹吸几次。